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PCR技术原理和应用

日期:2012-07-21   来源:   阅读数:1391


    据www.qgyyzs.net小编了解,pcr技术的原理如下:双链dna分子在一定的温度下分离成单链dna分子,在较低的温度下模板dna与短dna引物退火形成部分双链;dna聚合酶以单链dna分子为模板,在引物的作用下利用四种脱氧核苷酸为底物合成新的dna互补链。dna聚合酶需要引物的作用才能进行作用,所以新合成的dna链的起始位置是加入的引物与模板退火的位置决定的。通常,将含有待扩增dna样品的反应混合液在94℃左右加热1分钟,使双链dna变性,形成单链模板dna。降低反应温度,约在50℃左右,具体的与引物的长度有关,作用1分钟,使dna链引物与两条模板dna发生退火,结合到靶dna区段两端的互补序列位置。将反应混合物的温度提高到72℃作用,在dna聚合酶的作用下,从引物的3’端加入脱氧核苷酸,那么其就会沿着模板分子从3’→5’方向延伸。

    pcr技术的应用很广泛,是分子生物学和病原体学等学科中的重要工具,同时在临床诊断中有着重要的地位。pcr技术是二十世纪八十年代中期发展起来的体外核酸扩增技术,为一种在体外快速扩增特定基因或者dna序列的方法,又称为基因的体外扩增法。pcr技术特异、敏感、产率高、简便、重复性好、易自动化等优点突出。

    其在临床诊断中很重要,能够对细菌、病毒、螺旋体、支原体、衣原体、立克次氏体等病原体进行鉴定。对于人类遗传病的预测和诊断很方便,在法医学中是一种很强大的工具······