液相色谱仪器使用中一定要做好及时的清洗避免堵塞。

我们将结合WATERS UPLC的清洗方案来看看如何做好清洗。

当出现以下几种情况的时候应当对仪器进行清洗：紫外检测系统的噪音增大和/或基线漂移。质谱检测系统的灵敏度下降和/或信噪比变差。在通过ACQUITY UPLC控制台进行检测器灯的能量诊断时，观察到能量偏低（请参考ACQUITYUPLC控制台在线帮助）。在检测复杂生物基质时，观察到峰变形和/或进样次数偏多。有必要将本系统的流路系统恢复至几乎全新的洁净水平。本系统的清洗方法程序如下：

1. 拆除所有的溶剂过滤头。

2. 将色谱柱从系统分开，并在色谱柱的入口管路和出口管处路连接一个UPLC专用的两通（P/N700002636）或限流器（P/N205000547）。

3. 将A1 、A2、B1、B2流动相、柱塞杆密封垫冲洗、进样针弱洗和进样针强洗管路放入一个装有100％异丙醇的洁净瓶中。

说明：如果当前您的UPLC系统里的流动相或溶剂与异丙醇不相容，则先用合适的中间溶液冲洗，以确保相容。

4. 冲洗溶剂管路A1、A2、B1、B2各5min。

5. 冲洗柱塞杆密封垫。

6. 对强洗、弱洗和样品注射器进行5次冲洗。

7. 用50％A1和50％B1,以0.2mL/min的流速清洗系统5.0min。

8. 用50％A2和50％B2重复进行步骤7.

9. 将清洗溶剂放入样品瓶中，进行15次满定量环进样（进样方法请选择5Xoverfill）,运行时间=0.2min/流速=0.2mL/min。

10. 用100％甲醇重复进行3-9步，但第7-9步的流速改为1.0mL/min。

11. 用MilliQ水（或等价物）重复进行第3-9步，但第7-9步的流速改为1.0mL/min。

注意：如果连接有质谱检测器，则在进行第12步之前，将其从管道上移除。将洗液流向从两通或限流器出口转向废液排放口。适当时，你可将TUV或PDA留在管路上。然而，你可能需要更换成内径较大的废液管路以取代原来的限流器，以将压力保持在1000Psi以下，避免反压过高而损坏检测池。

12. 用30％硫酸水溶液重复进行第3-9步，但第7-9步的流速改为1.0mL/min。

注意：为避免损坏，请不要将密封垫冲洗管路置于本溶液中，请按照第14步，将该管路置于MilliQ水（或等价物）中。

13. 用MilliQ水（或等价物）重复进行第3-9步，但第7-9步的流速改为1.0mL/min。在继续进行下一步前，应持续冲洗，直至酸碱度呈中性（PH=7）。

14. 如有必要，重新连接质谱检测器。

15. 用100％甲醇重复进行第3-9步，但7-9步的流速改为1.0mL/min。

若想仪器用的好，维护保养很重要。仪器使用过程中，千万不要忽略或者省去一些看似不重要的步骤，例如流动相过滤、水相的更换、进样之前样品过滤膜等，等仪器出现故障之后，维修的成本和浪费的时间远大于平时的维护保养。