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蛋白纯化后,缓冲中的咪唑是否影响细胞测活?

日期:2022/10/29 22:04:20  阅读数:1501

如果你要测活的话,最好要先对你纯化的蛋白进行除盐,去除小分子干扰物。

除盐,去除小分子干扰物的方法有很多,这里我就说说适合你的方法。

第一,因为你手头上有超滤管,这个东西除了能浓缩蛋白,还有一个很重要的功能就是更换缓冲液,去除小分子。你选用3KD的超滤管,边浓缩边加入你测酶活想选择的缓冲溶液,重复几次的话,这样就能达到你去除咪唑的目的。

第二,GE的除盐柱,如sephadexG25等,就能完成更换缓冲溶液的目的。这个要有色谱系统或横流泵,这两者都没有的话,也可以用注射器手动实现。

第三,透析。