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凝胶电泳技术在分离药用蛋白或DNA上的应用

日期:2012-07-19   来源:   阅读数:558

    据www.qgyyzs.net小编了解,将某种分子放到特殊的电场中,其将会以一定的速度向某个电极的方向运动。某种分子在电场中的移动的速度称为电泳速率,其与电场强度正比,与分子所携带的净电荷量成正比,与分子大小、极性、介质的粘度系数等分子摩擦系数成反比。也就是说,电场强度越大,电泳分子携带的净电荷越多,迁移的速度也越快,反之就慢。

    在生理条件下,核酸分子磷酸基基团为离子化状态,故dna和rna多核苷酸链为多聚阴离子状态,在电场中会从负极移动向正极。在一定强度的电场中,dna分子的电泳速率是由分子大小和构型决定的。这就是应用凝胶电泳技术分离dna片段的基本的原理。在凝胶电泳中,还常常加入溴化乙锭染色,染色后的核酸分子在紫外光下面发出荧光,肉眼就可以看到大约五十纳克dna所形成的条带。琼脂糖为从龙须菜等海藻中提取的线状糖类高聚物,将其粉末加热融化后冷却可以形成很好的电泳介质,其密度由琼脂糖的浓度决定。琼脂糖凝胶电泳是一种很简便、快捷和常用的分离和纯化核酸的方法。

    聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体由催化剂temed在硫酸铵的作用下聚合成的长链,由交联剂n,n’-亚甲双丙烯酯参与交叉形成的凝胶。聚丙烯酰胺凝胶电泳适用于分离鉴定低分子量的蛋白质、小于1kb的dna片段和dna片度分析。其装载样本量大,能够回收高纯度的dna。